Typiska komponenter i enfluorescensmikroskopär:
Fluorescerande färgämnen (fluoroforer)
En fluorofor är en fluorescerande förening som avger ljus igen när den exciteras av ljus.
Fluoroforer innehåller vanligtvis flera bundna aromatiska grupper, eller är plana eller cykliska molekyler med flera π-bindningar.
Många fluorescerande färgämnen har designats för många biomolekyler.
Några av dessa är små molekyler som i sig är fluorescerande och binder biomolekylen av intresse. Bra exempel på dessa är nukleinsyrafärgningar såsom DAPI och Hoechst, falloidin, som används för att färga aktinfibrer i däggdjursceller.
ljuskälla
Fyra huvudtyper av ljuskällor används, inklusive xenonbågslampor eller kvicksilverlampor med excitationsfilter, lasrar och högeffekts-LED.
Lasrar används huvudsakligen i sofistikerade tekniker för fluorescensmikroskopi, medan xenonlampor, kvicksilverlampor och lysdioder med dikroiska excitationsfilter vanligtvis används i bredfältsfluorescensmikroskopi.
Excitationsfilter
Exciteraren är typiskt ett bandpassfilter som endast passerar våglängder som absorberas av fluoroforen, och därigenom minimerar excitation från andra fluorescerande källor och blockerar excitationsljus i fluorescensemissionsbandet.
dikroisk spegel
Ett dikroiskt filter eller tunnfilmsfilter är ett mycket exakt färgfilter som används för att selektivt reflektera ljus i ett litet spektrum av färger samtidigt som det reflekterar andra färger.
Emissionsfilter.
Strålaren är vanligtvis ett bandpassfilter som bara passerar den våglängd som emitteras av fluoroforen och blockerar allt oönskat ljus utanför detta band, speciellt excitationsljuset.
Filter säkerställer minimal bakgrund genom att filtrera bort oönskad excitationsenergi (inklusive UV och IR) eller prov- och systemautofluorescens.
